[hot] 단백질 전기영동
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작성일 20-12-20 00:56본문
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sample과 buffer를 섞을때 1대1로 섞을 수 있게 만든 것이 2X, 3대1로 섞을 수 있게 만든것이 4X이다.(max5분 정도)
③ 2번의 상층액(100㎛) 을 2X SDS-PAGE sample buffer와 섞는다. 전기영동[1] , 단백질 전기영동생활전문레포트 ,
순서
1.Title: 단백질 전기영동(1)
2.Date: 2004.11.02
3.Object: 전기영동을 통하여 식물내의 단백질을 알아보자
4.Material & Method : 식물의 잎, 줄기 혹은 뿌리, 에펜튜브, 원심분리기, heat plate, lysis buffer, SDS-PAGE sample buffer, 파이펫, 막자사발, 얼음튜브
① 단백질을 정량할 식물의 부분을 막자사발을 이용하여 lysis buffer(1ml)와함께 갈아준다.
레포트/생활전문
전기영동[1]
단백질 전기영동
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설명
단백질 전기영동에 대한 자료입니다.
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⑥ 식힌다.(loading buffer에 대한 total volume의 비율을 2X,4X의 수치로 …(투비컨티뉴드 )
다. -보관
5.Further study
-용액의 조성
1 X lysis buffer
1% NP-40
120 mM NaCl
40 mM Tris-HCl (pH8.0) + 1 mM PMSF (or 100 ug/ml)
>> 250 ul 4℃ 30’ >> 12,000 rpm, 30’
10 mM Phenylmethyl sulfonyl fluoride (PMSF); Dissolve PMSF in isopropanol at a concentration of 1.74 mg/ml (10mM). Divide the solution into aliquots and store at -20℃.
2 X SDS gel-loading buffer
protein sample을 comb으로 만든 lane에 loading할때 loading buffer와 섞은 후에 sample을 loading하게 된다 loading buffer에는 SDS, 2-mercaptoethanol, glycerol등이 들어간다.
④ 원심분리를 한다.
② 원심분리를 한다.(max에서 5분정도)
⑤ 90℃이상에서 5분정도 가열한다.